bglb肉汤培养基怎么配制?

一、bglb肉汤培养基怎么配制?

配制方法:

1、称取本品40g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装于带有小倒管的试管中,121℃高压灭菌15min,待冷至常温,备用。

2、样品的处理及稀释。略。

3、将LST肉汤产气管用直径为3mm的接种环移种至煌绿乳糖胆盐肉汤管中。

4、将试管放入到培养箱中36±1℃培养24h。

5、观察结果。按产气管数,查MPN表报告每克(mL)样品中大肠菌群的MPN值

二、肉汤培养基的配制的实验目的?

用于金黄色葡萄球菌和其他细菌的增菌培养

蛋白胨,牛肉粉提供碳源、氮源和维生素;氯化钠维持均匀的渗透压。

三、怎样配制100ml普通肉汤培养基?

取普通肉汤培养基2.4克,加蒸馏水至100毫升,加热溶解,分装,高压蒸汽灭菌20-30分,即可。

四、培养基的配制?

配置步骤有6步:用水、称量、复水、灭菌、pH测定、配制好的培养基保存

第一,用水  培养基制备用水应使用电阻率不小于30万Ωcm的蒸馏水或与其同质的水,最好不使用离子交换器生产的去离子水。

  第二,称量  称量时要用专用的角匙,避免交叉污染而影响检验结果;干粉培养基易吸潮,如有条件,尽量在湿度较低的房间称取培养基。  第三,复水  复水时不得用铜锅或铁锅,以防有离子混入培养基中,影响微生物的生长;容器的大小需大于复水后培养基总体积的2倍以上,避免在加热溶解过程中,培养基溢出;含有琼脂粉的培养基,在加热溶解之前可以浸泡数分钟;加热培养基时一定要进行搅拌,特别是琼脂类培养基。为避免烧焦和沸腾溢出,对于少量的培养基最好使用沸水浴进行加热。烧糊的培养基营养物质被破坏,并可产生有毒物质,如发现焦化,或未溶解均匀前培养基有溢出,该培养基即不能使用,应重新制备。对于琼脂类培养基进行再融化时应使用沸水浴或流动蒸汽进行加热,最多只能加热两次,第二次再融化后仍未用完的培养基应弃去。

  第四,灭菌  一般培养基采用湿热灭菌,即高压蒸汽灭菌,通常是121℃15 min,含糖或特殊培养基,按照国家标准或生产商提供的说明灭菌。已配制好的培养基必须立即灭菌,避免微生物生长繁殖而消耗养分,改变培养基的酸碱度。高温可破坏培养基的营养成分,还会使琼脂的凝胶强度下降,因此必须严格控制灭菌温度和时间,并且不可重复灭菌。高压蒸汽灭菌锅的压力表等要定期进行检定,并定期采用生物指示菌法或化学变色纸片对灭菌效果进行验证。  第五,pH测定微生物必须在适宜的pH范围内才能正常生长繁殖或体现其生物特性。培养基配方要求的pH为灭菌或消毒后的pH值,即培养基使用前的pH,并应在25℃温度下采用精密酸度计进行测量,固体琼脂培养基应以特殊的胶体表面测量电极进行测量。使用过程中,如果需要调整培养基的pH,应用1mol/L Na0H或lmol/LHCL调整,注意不可反复调pH,否则会影响培养基的渗透压。

  第六,配制好的培养基保存  灭菌以后培养基应该迅速冷却至所需温度,避免长时间保存在灭菌锅内,造成过度灭菌,影响培养基的营养成分或选择性效果。所配制的培养基的量,应该是在最长保存期限内正好使用完。含染料的培养基应闭光保存;倒好的琼脂平板如果配制的当天未使用完,应于冷藏保存,如果保存时间超过2天,应将其放入密封的塑料袋中保存;配好的肉汤类培养基如果保存时间超过2个星期,应将其放在带有螺旋盖的试管或其它密闭的试管或容器中防止蒸发。

五、阿尔法培养基配制?

1、配制用水

培养基的大部分是水,所以水的质量直接影响培养基的质量。按Waymouth标准,水的电阻应为200万欧姆,一般实验室里以玻璃蒸馏器制备的

双蒸水或三蒸水可以符合使用条件。

2、培养基

培养基有天然、人工两种。一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基,以双蒸或三蒸水配制。NaHCO3(或HCl)调pH至7.2-7.4,若pH值超过7.6或远低于6.8,则大多数细胞不能生长。RPMI-1640不耐高压灭菌,使用前需经灭菌0.22μm孔径滤膜滤过处理。

3、血清

培养中常使用小牛血清(或胎牛血清)。血清亦不能高压灭菌,无菌的小牛血清需在56℃水浴30分钟灭活补体,置4℃冰箱存放待用。配制时含量视培养细胞种类、时间而定,一般用10—15%。由于血清成分复杂、条件不易控制,可选用无血清培养基。

4、抗菌素

为防止培养时期细菌的污染,可在培养基中添加适当抗菌素,一般用量与组织细胞培养相同:卡那霉素100单位/毫升,或双抗--青霉素100单位/毫升,链霉素100微克/毫升。

5、植物血凝素(PHA)

非增殖期的细胞不能制备染色体,如人外周血淋巴细胞,但在离体培养过程中,在PHA的作用下,可被刺激转化为淋巴母细胞而进入有丝分裂。

六、tsa培养基配制?

TSA培养基又称大豆酪蛋白琼脂培养基,配方如下:

配方(每升) 含量

酪蛋白胰酶消化物 15g

大豆粉木瓜蛋白酶消化物 5g

氯化钠   5g

琼脂 15g

最终 pH 7.3±0.2

七、sd培养基配制?

SD是含有盐类、微量元素、维生素、氮源(不含氨基酸的酵母氮碱)和葡萄糖的合成基本培养基。

注意:氮源(不含氨基酸的酵母氮碱)是这种培养基用于筛选的关键,LB,YPD这种复合培养基因为用到了酵母提取物,蛋白胨,基本是氮源全营养的,肯定是不能用来做氮源筛选的=============================================================

(2)SD培养基配方及配置方法:

注意,配置SD培养基必须先要知道你所用到的宿主酵母的基因型,至少要知道你用的酵母菌有哪些氨基酸缺陷。以我唯一接触过的酿酒酵母为例

八、msr培养基配制?

MRS medium,DeMan-Rogosa-Sharpe medium一种适合各种乳杆菌(Lactobacillus spp)生长的通用培养基。

成分:

牛肉 膏10.0g,

酵母膏5.0g,

蛋白胨10.0g,

葡萄糖(或其他糖)20.0g(最好单独作过 滤灭菌,并于使用前混入培养基中),

K2HPO42.0g,

醋酸钠5.0g,

MgSO4·7H2O 0.2g,

MnSO4·4H2O0.05g,

吐温80 1.0g,

柠檬酸三铵2.0g,

琼脂15.0g,

加蒸馏 水至1 000ml。

灭菌前pH为6.2~6.6。

九、ecm培养基配制?

MEM培养基(Minimum Essential Medium)是动物细胞培养中的常用的培养基,配置如下:

1.配置前准备:配置培养基新制备的milli water。调节pH值的酸碱溶液也应该使用这种水配置。制备培养基的器皿清洗干净,并用milli water润洗两次。

2.溶解培养基:取5%终体积的milli water,加入到1L玻璃杯中,将干粉培养基倒入烧杯,水洗包装袋内面两次,倒入培养液中。磁力搅拌助溶。

3.补加试剂:根据包装袋说明加入NaHCO3(2.2g),HEPES(2.383,10mmol)、非必需氨基酸(可不加,10ml)。

4.加抗生素:一般抗生素终浓度——青霉素100U/ml,链霉素100U/ml。1L加入10ml储备液。

5.调pH值:加水到1000ml,然后用HCL或者NaOH调节pH到7.2。

6.过滤除菌:采用0.22um滤膜。过滤后分装于小瓶中(100或200ml)。过滤后pH值一般上升0.1-0.3。

7.加小牛血清:根据培养基配置的量将小牛血清分装,冷冻保存(-20度)。临用前将加入小牛血清10%

十、emb培养基配制?

EMB培养基 EMB是伊红美蓝琼脂培养基的简称。

其配方为:

成分:蛋白胨10g 乳糖 10g K2HPO4 2g 2%伊红Y水溶液 20ml 0.5%美蓝水溶液13ml pH 7.4

溶于1L水中,灭菌待用。